隨著生活水平的不斷提高, 食品安全問題越來越受人們重視, 與食品安全密切相關的食品污染, 尤其是微生物造成的污染在自然界中處處可見。微生物檢測已成為保障食品安全的重要舉措。傳統的檢測方法費時費力, 已不能滿足食品安全質控的需求。開發各種新型微生物快速檢測技術, 提高微生物檢測的速率和質量, 是有效預防和控制各種微生物感染, 保證人類健康發展的重要措施之一[ 1~3 ] 。用顯色培養基鑒定微生物是在生化反應的基礎上開發的新技術, 也是國內外研發的熱點。其原理是將微生物胞內酶的種類及反應條件作為微生物分類鑒定的主要依據, 通過在分離培養基中加入微生物特異性酶的底物, 該底物由發色基團和微生物可代謝物質組成, 通常無色, 但在特異性酶作用下游離出發色基團并顯示一定顏色, 直接觀察菌落顏色就可對菌種做出鑒定, 減少了對菌株進行純培養和進一步生化鑒定的步驟 。
顯色培養基(Chromogenic/Fluorogenic Culture Media)是一類利用微生物自身代謝產生的酶與相應顯色底物反應顯色的原理來檢測微生物的新型培養基。這些相應的顯色底物是由產色基因和微生物部分可代謝物質組成,在特異性酶作用下,游離出產色基因顯示一定顏色,直接觀察菌落顏色即可對菌種作出鑒定。它是一種新型分離培養基,利用顯色培養基進行微生物的篩選分離,其反應的靈敏度和特異性大大優于傳統培養基。
顯色培養基應用評價
用顯色培養基檢測微生物是一種新技術, 直接根據菌落顏色就可對菌種作出鑒定,減少了進行補充試驗的必要。與傳統的檢測方法相比, 顯色培養基的靈敏性、特異性和選擇性都明顯優于傳統培養基, 且節省時間、人力和資金投入, 為食品微生物檢測提供了新途徑。國外這方面的研究開展比較早, 法國CHROMagar公司1974年就開始致力于顯色培養基的開發, 至今已先后研制出針對沙門氏菌、大腸桿菌、李斯特菌和弧菌等各種微生物的顯色培養基。之后, 瑞士Biosynth公司、英國Oxiod公司、德國__Merck公司等相繼推出各自的系列顯色培養基, 有些已設計成微生物快速檢測試劑盒,并申請了。
但是, 顯色培養基也存在許多問題,
1.檢測混合感染的微生物時,由于非目標菌的競爭作用, 常常會造成目標菌漏檢和檢測結果假陰性, 或由于非目標菌也存在特異性酶反應造成檢測結果的假陽性, 從而降低了顯色培養基的靈敏性和特異性;
2.某種細菌不同血清型可能存在特異性酶反應的差異, 結果在顯色培養基上出現不同顏色的菌落, 還需要輔助觀察或傳統生化試驗才能對菌株作鑒定;
3.顯色培養基中的抑菌劑在抑制雜菌生長的同時可能對目標菌產生一定的影響;
4.一些顯色培養基在檢測過程中只能對目標菌進行定性分析, 還不能定量分析。因此, 顯色培養基的設計尚待優化。