緩激肽是一種含有9種氨基酸的生理和藥理活性肽,由蛋白質的激肽基團衍生而來。激肽是可以促使血管舒張、血管通透性增強、一氧化氮釋放和花生四烯酸流動的效應因子。它是血壓、腎功能和心臟功能的重要調節因子,還參與炎癥反應。緩激肽可引起血管擴張,從而導致血壓降低。
緩激肽是一種含有9種氨基酸的生理和藥理活性肽,由蛋白質的激肽基團衍生而來。激肽是可以促使血管舒張、血管通透性增強、一氧化氮釋放和花生四烯酸流動的效應因子。它是血壓、腎功能和心臟功能的重要調節因子,還參與炎癥反應。緩激肽可引起血管擴張,從而導致血壓降低。
因此,對這種激素肽的變化進行高靈敏度、高選擇性和高準確度地定量,并將其作為疾病進展或藥物治療的評估指標,將會極為有利。盡管以往都是通過配體結合試驗(LBAs)對生物制劑進行定量分析,但在過去幾年中利用LC-MS/MS分析大分子已成為一種趨勢。這在某種程度上是因為LBAs產生顯著的交叉反應問題并且缺乏標準化。
LC-MS/MS具有多種優勢,例如開發時間更短、準確度和精度更高、可重復進樣,并且容易區分相似度很高的類似物、代謝物或內源性干擾物。常見的肽通常難以通過LC-MS/MS進行分析,這是因為其不易離子化以及不易產生理想的碎片離子而導致MS靈敏度較低,從而使得LC和樣品制備方法開發非常困難。由于緩激肽在血漿中的濃度低至pg/mL水平且代謝速度快,在采血和樣品制備過程中還可通過蛋白水解人為生成,因此對其進行準確定量相當困難。
本研究采用了專門設計的血液收集技術以防止體外緩激肽的形成,并且利用混合型固相萃取(SPE)和實心核顆粒色譜柱,zui大限度降低并消除基質干擾的同時提高定量分析的靈敏度。
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