動物外周血中性粒細胞分離液試劑盒現貨供應
取新鮮抗凝全血,血液體積小于5mL時,在離心管中先加入4mL試劑A,后將2mL試劑C小心疊加于試劑A之上,形成梯度界面(血液體積大于等于5mL,試劑A與試劑C比例2:1,試劑總量與稀
釋后的樣本量相等。但二者的總體積不能超過離心管的三分之二,否則會影響分離效果),將血液平鋪到分離液液面上方,注意保持兩液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取血液,然后將血液小心的平鋪于分離液上,因為兩者的密度差異,將形成明顯的分層界面。如果樣品較多,加樣的時間較長,在離心之前出現紅細胞成團下沉屬正常現象。)
注意事項:
A. 開封前顛倒混勻,本分離液為無菌產品,為延長分離液保存時間,請在無菌條件下啟封,避免微生物污染。。
B. 分離液使用時應始終保持室溫(18℃~25℃),如室內溫度較低,可將分離液預熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心,可能會導致白膜層中紅細胞污染加重。
C. 血液樣本最好為新鮮抗凝血(采血2 h以內),為保持淋巴細胞的活性,應避免冷凍和冷藏。
D. 血液樣本不需稀釋,直接進行分離即可。
E. 稀釋血液或洗滌細胞,不可使用含Ca、Mg離子的緩沖液及培養液,其成分會導致血細胞凝集,大大降低細胞得率及純度。
F. 部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其帶有的靜電作用,可能會導致細胞掛壁,影響分離效果。
G. 血液樣本的粘稠度或者是溫度差異,可能會影響分離效果,可以調節離心轉數和離心時間,摸索最佳的分離條件。
H. 如果要進一步對分離的細胞進行培養,那在收集血液和分離過程中,注意無菌操作,避免微生物污染。
I. 不同動物血液在不同比重分離液中的細胞離散系數及細胞帶電不同,用戶在制定分離液時應提供所需分離液的比重、動物種屬及被分離細胞的名稱。