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土壤DNA提取試劑盒使用技巧

發布時間: 2021-12-14  點擊次數: 464次

土壤DNA提取試劑盒使用技巧

 

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適用于各類土壤樣品中核酸的提取。樣本預處理采用陶瓷珠和二氧化硅顆粒混合而成的玻璃珠,可有效處理真細菌孢子和內生孢子,革蘭氏陽性細菌,酵母,藻類,線蟲和真菌等土壤中的各類微生物。離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司*新型材料,配合本公司*的裂解液配方可以可在40 min內大限度的回收高純度核酸。提取的DNA純度高,質量穩定可靠,可適用于各種下游應用實驗,如酶切、PCR等實驗。

 

 

運輸與保存方法
室溫運輸,室溫保存,有效期 12 個月。

 


注意事項
1. 避免試劑長時間暴露于空氣中產生揮發、氧化、pH 值變化,各溶液使用后應及時蓋緊蓋子。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
3. 本產品僅作科研用途!
實驗前準備
1. 自備設備和試劑:臺式離心機、振蕩儀、水浴鍋或金屬浴,無水乙醇,離心管等。
2. 所有的離心步驟均在室溫完成,使用可以達到 12,000 rpm 轉速的傳統臺式離心機

 

 

DNA 提?。?br/>1. 將 DNA 吸附柱套入 2 mL 收集管中,備用。
2. 將預處理混合液加入到 DNA 吸附柱中,12,000 rpm 室溫離心 1 min,棄掉廢液。
【注】:混合液每次大加入體積 700 μL,可分多次離心。
【注】:離心后,若濾膜仍有液體殘留,可延長離心時間至 5 min。
3. 將 DNA 吸附柱放回收集管,加入 600 µL 漂洗液 W*,12,000 rpm 室溫離心 30 sec,棄廢液。
【注】:確保漂洗液 W*已添加無水乙醇。
4. 重復一遍步驟 3。
5. 將 DNA 吸附柱放回收集管,空柱 12,000 rpm 室溫離心 2 min,以除去殘留的漂洗液 W*。
6. 將 DNA 吸附柱放入新的潔凈 1.5 mL 離心管中,在濾膜中央加入 30-100 µL 洗脫液,室溫放置 3 min。然后 12,000 rpm 離
心 1 min,收集濾液即為樣本 DNA。
【注】:可通過以下方式提高回收產量:①65℃預熱洗脫液;②將濾液再次上柱,室溫放置 3 min,洗脫。
7. 樣品 DNA 可置于-20℃短期保存,-80℃保存。
【注】:過量的 DNA 可能抑制下游 PCR 反應,遇到這種情況建議將 DNA 模板進行稀釋后試用。 

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