国内精品伊人久久久久网站-国产精品午夜无码av天美传媒-亚洲精品欧美二区三区中文字幕-精品无码久久久久久国产

熱門搜索:ELISA試劑盒,生物試劑,質(zhì)控品,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),化學(xué)試劑,生化試劑盒
產(chǎn)品分類

Product category

技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁 > 技術(shù)文章 > CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒為您的實(shí)驗(yàn)錦上添花

CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒為您的實(shí)驗(yàn)錦上添花

發(fā)布時間: 2017-09-06  點(diǎn)擊次數(shù): 1223次

CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒為您的實(shí)驗(yàn)錦上添花!

 

注意事項(xiàng):

①建議先做幾個孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入 CCK-8 試劑后的培養(yǎng)時間。

②白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時間。

③當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn) 96 孔板時,貼壁細(xì)胞的zui小接種量至少為 1 ,000 個/孔 (100 µL 培養(yǎng)基)。檢測白細(xì)胞時的靈敏度相對較低,因此接種量不低于 2,500 個/孔 ( 100 µL 培養(yǎng)基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板實(shí)驗(yàn),請先計算每孔相應(yīng)的接種量,并按照每孔培養(yǎng)基總體積的 10% 加入 CCK-8 溶液。

 

④如果沒有 450nm 的濾光片,可以使用吸光度在 430-490 nm 之間的濾光片,但是 450nm 檢測靈敏度zui高。

⑤培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計算時,通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不會對檢測造成影響。

Cell Counting Kit-8 簡稱CCK-8 試劑盒,為MTT 法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。可用于藥物篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)。

使用說明: 
一、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(測定細(xì)胞具體數(shù)量時 (測定細(xì)胞具體數(shù)量時) 
1、先用細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量,然后接種細(xì)胞。 
2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細(xì)胞濃度梯度,一般要做 3-5 個細(xì)胞濃度梯度,每組 3-6 個復(fù)孔。 
3、接種后培養(yǎng)至細(xì)胞貼壁,然后加 CCK-8 試劑培養(yǎng)一定時間后測定 OD 值,制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)(X 軸),OD 值為縱坐標(biāo)(Y 軸)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以測定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量(試用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是實(shí)驗(yàn)的條件要一致,便于確定細(xì)胞的接種數(shù)量以及加入 CCK-8 后的培養(yǎng)時間。)

CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒為您的實(shí)驗(yàn)錦上添花!

二、細(xì)胞活性檢測

1、在 96 孔板中接種細(xì)胞懸液(100µL/孔)。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)(在 37℃,5% CO2 的條件下)。

2、向每孔加入 10µL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數(shù))。

3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時。

4、用酶標(biāo)儀測定在 450nm 處的吸光度。

5、如果暫時不測定 OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。

三、細(xì)胞增值-毒性檢測

1、在 96 孔板中配置 100 µL 的細(xì)胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng) 24 小時(在 37 ℃,5% CO2 的條件下)。

2、向培養(yǎng)板加入 10µL 不同濃度的待測物質(zhì)。在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r間(例如:6、12、24 或 48 小時)。

3、向每孔加入 10 µL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數(shù))。如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,可在加 CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的培養(yǎng)基),去掉藥物影響。

4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時。

5、用酶標(biāo)儀測定在 450 nm 處的吸光度。

6、如果暫時不測定 OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。

活力計算:.

細(xì)胞活力(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[ A(0 加藥)-A(空白)]×100

A(加藥):具有細(xì)胞、CCK-8 溶液和藥物溶液的孔的吸光度

A(空白):具有培養(yǎng)基和 CCK-8 溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度

A(0 加藥):具有細(xì)胞、CCK-8 溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度

細(xì)胞活力:細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力

CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒為您的實(shí)驗(yàn)錦上添花!

 

  • 聯(lián)系電話電話025-66060117
  • 傳真傳真
  • 郵箱郵箱3452523816@qq.com
  • 地址公司地址南京市雨花臺區(qū)賽虹橋街道小行路
© 2024 版權(quán)所有:南京信帆生物技術(shù)有限公司   備案號:蘇ICP備16008122號-4   sitemap.xml   管理登陸   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)       
  • 公眾號二維碼

聯(lián)


主站蜘蛛池模板: 无码a级毛片免费视频内谢| 欧美人与性动交α欧美精品| 国产乱子夫妻xx黑人xyx真爽| 国产口爆吞精在线视频| 国产肉体ⅹxxx137大胆| 成人午夜精品无码区久久 | 少妇裸体性生交| 亚洲av毛片一区二区三区| 精品无码中文视频在线观看| 长腿校花无力呻吟娇喘| 国产精品9999久久久久| 欧美日韩精品一区二区在线播放 | 完整版免费av片| 暖暖 免费 高清 日本 在线 | 中文字幕一区二区三区精华液| 日韩一区二区三区无码影院| 特级做a爰片毛片免费看108| 国精产品一区二区三区| www夜片内射视频日韩精品成人 | 窝窝人体色www| 亚洲理论电影在线观看| 国产精品久久久久久无码五月| 收集最新中文国产中文字幕| 亚洲视频一区| 欧美精品videosex极品| 精品无码国产污污污免费网站| 欲色天天网综合久久| 免费无码又爽又刺激高潮| 精品一区二区三区免费视频| 亚洲成av大片大片在线播放| 中文字幕无码av波多野吉衣| 抽搐一进一出gif免费动态| 最近免费中文字幕中文高清6| a级毛片无码免费真人久久| 国产精品一卡二卡三卡四卡 | 国产免费一区二区三区在线观看 | 欧美黑人添添高潮a片www| 极品熟妇大蝴蝶20p| 啦啦啦www在线观看免费视频| 人妻少妇无码中文幕久久| 巨胸喷奶水www视频网站|