電泳緩沖液0.1mol/L,pH8.6用途:操作簡單、快速、廉價。已經廣泛用于血清蛋白,血紅蛋白,球蛋白,脂蛋白,糖蛋 白,甲胎蛋白,類固醇激素及同工酶等的分離分析中,盡管它的分辨力比聚丙酰胺凝膠電泳低,但它具有簡單,快速等優點。
產品特點:
(1)醋酸纖維薄膜對蛋白質樣品吸附極少,無“拖尾"現象,染色后背景能*脫色,各種蛋白質染色帶分離清晰,因而提高了測定的精確性。
(2)快速省時。由于醋酸纖維薄膜親水性較濾紙小,薄膜中所容納的緩沖液也較少,電滲作用小,電泳時大部分電流是由樣品傳導的,所以分離速度快,電泳時間短,一般電泳45—60min即可,加上染色,脫色,整個電泳完成僅需90min左右。
(3)靈敏度高,樣品用量少。 血清蛋白僅需2μl血清,甚至加樣體積少至0.1μl,僅含5μg蛋白樣品也可得到清晰的分離帶。醫學檢驗利用這一點,檢測在病理情況下微量異常蛋白的改變。
(4)應用面廣。某些蛋白在紙上電泳不易分離,如胎兒甲種球蛋白,溶-菌酶,胰島素,組蛋白等用醋酸纖維薄膜電泳能較好地分離。
(5)醋酸纖維薄膜電泳染色后,經冰乙酸,乙醇混合液或其它溶液浸泡后可制成透明的干板,有利于掃描定量及保存。
(6)醋酸纖維薄膜電泳與聚丙烯酰胺凝膠電泳相比,操作簡單,但分離效果不太好。如血清蛋白在醋酸纖維素薄膜電泳中,只能分離出5—6條區帶,而聚丙烯酰胺凝膠電泳可分離出數10條區帶。
市售醋酸纖維薄膜均為干膜片,薄膜的浸潤與選膜是電泳成敗的重要關鍵之一。將干膜片漂浮于電極緩沖液表面,其目的是選擇膜片厚薄及均勻度,如漂浮15s—30s時,膜片吸水不均勻,則有白斑點或條紋,這提示膜片厚薄不勻,應舍去不用,以免造成電泳后區帶扭曲,界線不清,背景脫色困難,結果難以重復。由于醋酸纖維薄膜親水性比紙小,浸泡30min以上是保證膜片上有一定量的緩沖液,并使其恢復到原來多孔的網狀結構。好是讓漂浮于緩沖液的薄膜吸滿緩沖液后自然下沉,這樣可將膜片上聚集的小氣泡趕著走。點樣時,應將膜片表面多余的緩沖液用濾紙吸去,以免緩沖液太多引起樣品擴散。但也不能吸得太干,太干則樣品不易進入薄膜的網孔內,而造成電泳起始點參差不齊,影響分離效果。吸水量以不干不濕為宜。為防止指紋感染,取膜時,應戴指套或用鑷子。
電泳緩沖液0.1mol/L,pH8.6用途