甲胎蛋白(AFP)單克隆 標記抗體
抗體選擇與使用過程中,多少還會遇到一些意想不到的事情。有些細節,還是需要多注意一些。如在選擇做阻斷或中和實驗時,有時需要將抗體加到細胞培養液中,這是需要注意抗體是否含有疊氮鈉。如果是大包裝的抗體,進行分裝是比較節約的方式,如果是高效價的,可以配成母液再分裝。抗體的短時間運輸,用普通冰塊保持溫度是可以滿足要求的。
另外不要糾結于 WB 過程中分子量的問題。很多時候,我們看到同樣的抗體,不同的品牌,甚至同一品牌不同的貨號,標注的分子量都不一樣。其實可能只是生物試劑商只檢測時使用了不同的種屬不同的樣品類型,或是參照了不同的文獻,對使用者來說,同樣的樣品,不管使用哪個品牌的,只要抗體是對的,目的條帶只會出現在相同的位置。關于分子量的問題,一般不建議看產品說明,WB 中條帶的位置由樣品決定,并不會因為抗體不同而不同。所以在檢測蛋白之前,我們可以通過數據庫或參考文獻,對將要檢測的蛋白做個比較全面的了解,包括其可能剪切與修飾的情況、表型的情況等。在第一次使用一個新的抗體時,不要根據分子量橫向剪膜,可以保留幾個全泳道,看看條帶位置或分布的情況。
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