易洗脫鏈霉親和素瓊脂
鏈霉親和素-瓊脂糖凝膠FF(易洗脫型)
(Easy Elution Streptavidin-Berpharose FF )
1.產品介紹
鏈霉親和素瓊脂糖凝膠FF(易洗脫型)是一種將鏈霉親和素(ee)鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的親和層析分離介質,利用生*素與鏈霉親和素配體之間的相互作用分離純化生*素或生*素化的抗原、抗體、核酸等物質。
本產品與普通的鏈霉親和素-瓊脂糖凝膠FF相比,優勢在于可以在溫和條件下解離洗脫生*素化物質,而不必再使用變性條件洗脫,從而能夠更好的保持純化樣本的活性,增加填料的使用壽命。
2.規格
1ml(預裝柱)、5ml(預裝柱)、10ml(預裝柱)、20ml、100ml、500ml
3.產品性能
性能
指標
基質
4%瓊脂糖微球
配基
鏈霉親和素(ee)
配基密度
6mg/ml
載量
≥6mg生*素化蛋白/ml
粒徑
45-165μm
推薦流速/*大流速
15-100 /700 cm/h
耐反壓
0.3MPa
pH穩定范圍
短時間pH3-13
長時間pH4-10
儲存緩沖液
20%乙醇
儲存溫度
4-8℃
4.純化流程
①緩沖液:
結合緩沖液:20mM NaH2PO4、 150mM NaCl、pH7.4
洗脫緩沖液: 1-5mM D-生*素
②樣品準備:
上柱的樣品應盡量保持與結合緩沖液一致。通常可用透析、超濾、稀釋等方法處理樣品。并且上柱前應過0.45μm濾膜或高速離心去除不溶物。
③樣品純化:
(1)裝柱、平衡:取適量的填料裝入合適的層析柱中,用結合緩沖液平衡5個柱體積,建議流速為100cm/h。
(2)上樣:將準備好的樣品緩慢上柱,為保證樣品與鏈霉親和素充分結合,應控制好上樣流速,建議流速為15-50cm/h。
(3)淋洗:上樣后用結合緩沖液平衡10個柱體積以上,或平衡至基線,洗去雜質,推薦流速為100cm/h。
(4)競爭性洗脫:用洗脫緩沖液洗脫抗體,收集洗脫峰,建議流速為100cm/h。
(5)清洗:洗脫后的柱子應用結合緩沖液平衡,并用20%乙醇保存柱子,于4-8度保存。
5.注意事項
1) 使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內產生氣泡,影響純化效果。
2) 去除一些沉淀或變性物質,建議使用下面的方法用2倍柱體積的0.1M NaOH溶液進行清洗,然后立即用5倍柱體積的PBS,pH7.4清洗。去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質3-4倍柱體積70%乙醇或2倍柱體積的1% TritonX-100清洗,然后立即用5倍柱體積的PBS,pH 7.4清洗。
3) 本產品保存條件為20%乙醇,4-8℃。
4) 2-25℃,常壓,避光運輸。
5) 僅供科研實驗使用。
易洗脫鏈霉親和素瓊脂
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