人a干擾素(IFN-a)elisa試劑盒基本信息
α-干擾素是機體免疫細胞產(chǎn)生的一種細胞因子,是機體受到病毒感染時,免疫細胞通過抗病毒應答反應而產(chǎn)生的一組結(jié)構(gòu)類似、功能接近的低分子糖蛋白。干擾素在機體的免疫系統(tǒng)中起著非常重要的作用。干擾素與很多亞型,其中zui大的一類亞型是α-干擾素。人α-干擾素,是從人白細胞中克隆出α-干擾素基因,通過的基因工程技術(shù),在體外大規(guī)模生物試劑出的人α-干擾素。與天然α-干擾素相比,它純度高、副作用低、療效更確切。目前重組人α-干擾素亞型較多,其中α-1b是正常中國人體內(nèi)產(chǎn)生zui多的一種亞型,經(jīng)實驗證明重組α-1b干擾素具有療效顯著,而副作用顯著低于α-2a和α-2b的特點,因而更適合黃種人使用。
人a干擾素(IFN-a)elisa試劑盒
雙抗體夾心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
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