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免疫組織化實驗代測技術分類
(1)根據染色方式分成:① 貼片染色
② 漂浮染色
(2)根據Ag—Ab結合方式分成:
① 直接法
② 間接法
③ 多層法
(3)按標記物的性質分成:
① 免疫熒光技術(免疫熒光法)
② 免疫酶技術(酶標抗體法、橋法、PAD 法、 ABC法)
③ 免疫金屬技術(免疫鐵蛋白法、免疫金 染色法、蛋白A金法)
免疫組織化實驗代測標記物
(1)必要性:組織細胞內Ag—Ab結合反應一般是不可見的,若在鏡下檢測,則必須具有可視性標記物。
(2)常用標記物
① 熒光素:zui常用的是異硫一氰酸熒光素(Fluorescein isothiocyanate ,FITC) —— 熒光顯微鏡下 呈綠色熒光
四乙基羅達明(rho—damine RB200)——熒光顯微鏡下發橙紅色熒光
② 酶:辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶。
③ 生物素:(Biotin)
④ 鐵蛋白金等:主要應用于免疫電鏡。其他:如同位素(因涉及污染和防護難一般不用)
應用
凡是組織細胞內具有抗原性的物質,如肽類、激素、神經遞質、細胞因子、受體、表面抗原等等均可用免疫組織化學方法顯示,因而目前在基礎與科研中被廣泛應用。zui近幾年,分子生物學研究異常活躍,但zui終還要歸到形態上來。用免疫組織化學方法對所研究的大分子分子進行定位,進而深入研究其功能。
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