溶菌酶簡介
中文名稱:溶菌酶
中文同義詞:脆壁質酶;雞蛋白;胞壁質酶(N-乙酰胞壁質聚糖水解酶);溶菌酶(雞蛋清)
英文名稱:Lysozyme,簡稱LZM
英文同義詞:REDUCED LYSOZYME,WATER SOLUBLE;MUCOPEPTIDE-GLYCOHYDROLASE;MUCOPEPTIDE GLYCOLHYDROLASE;MUCOPEPTIDE N-ACETYLMURAMOYLHYDROLASE;VI: CHLORIDE;MURAMIDASE;MURAMIDASE GRADE III
CAS號:12650-88-3
EINECS號: 235-747-3[1]
分子式:無
分子量:14000左右
EINECS號:235-747-3
相關類別:發酵劑;Enzymes;酶;生化試劑;生物化學品。
溶菌酶性質
儲存條件:2-8°C
form:powder
color:white
危險品標志B
安全說明23-24/25-22
WGK Germany3
RTECS號 OL5989850
F3-10
白色或微白色凍干粉,溶于水,不溶于丙酮,pI為11.0-11.35,zui適pH值6.5。
穩定性:酸性介質中可穩定存在,堿性介質中易失活;96℃, pH值為3條件下,15min后活力保持87%。
抑制劑:有碘、咪唑和吲哚衍生物、表面活性劑(十二烷基硫酸鈉、醇類和碳鏈不少于12的脂肪酸)。1%水溶液在281.5nm處的吸光系數為26.4。通過水解細菌細胞壁的肽聚糖來溶菌。
酶反應:Micrococcus luteus或Micrococcus lysodeikticus菌懸浮液═溶菌并澄清。
溶菌酶用途
用于生化研究,上用于急慢性咽喉炎、扁平苔癬、扁平疣等疾病的治療。
生物試劑
以蛋清為原料,在pH6.5條件下用弱酸性陽離子交換樹脂732吸附后,再用硫酸銨洗脫,經透析后冷凍干燥得產品。
溶菌酶制備
溶菌酶是采用生物工程技術進行克隆、提取而制取,它是一種天然酶,安全綠色的添加劑,無抗藥性。
該酶廣泛存在于人體多種組織中,鳥類和家禽的蛋清、哺乳動物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁等體液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量zui為豐富。從雞蛋清中提取分離的溶菌酶是由18種129個氨基酸殘基構成的單一肽鏈。它富含堿性氨基酸,有4對二硫鍵維持酶構型,是一種堿性蛋白質,其N端為賴氨酸,C端為亮氨酸。可分解溶壁微球菌、巨大芽孢桿菌、黃色八疊球菌等革蘭陽性菌。
溶菌酶在等電點以下較廣泛的pH值范圍內,分子帶正電荷,可吸附于弱酸性陽離子交換樹脂上,洗脫后鹽析,可得溶菌酶沉淀,再進行精制可得成品。蛋清吸附↓724樹脂洗滌↓緩沖液洗脫↓硫酸銨溶液鹽析透析去堿性蛋白↓NaOH凍干溶菌酶凍干粉沉淀干燥溶菌酶在5~10℃下,將新鮮蛋清540kg加入到已處理好的80kg 724樹脂中,攪拌吸附6h,在0~5℃靜置。傾出上層蛋清,樹脂離心甩干,用蒸餾水反復洗去黏附的卵蛋白,然后將樹脂裝入柱內,用0?15mol/L、pH=6?5磷酸緩沖溶液約150L洗滌樹脂,再用約600L的10%硫酸銨溶液洗脫,收集洗脫液。洗脫液中加硫酸銨,使zui終含硫酸銨量為40%,有白色沉淀生成,冷處放置。虹吸上層清液,沉淀吸濾抽干,再用1倍蒸餾水溶解沉淀呈稀糊狀,然后裝入透析袋,在約5℃的條件下,對蒸餾水透析24h左右,中間換水2~3次。離心去除沉淀,沉淀再用少量水洗一次,洗液與離心液合并。再往透析清液中慢慢加入1mol/L溶液,同時不斷攪拌,使pH值上升到8?0~9?0,如有白色沉淀,即離心除去。然后用3mol/L鹽酸調pH=5?0,冷凍干燥,即得白色片狀溶菌酶。也可將離心液用3mol/L鹽酸調pH=3?5,在攪拌下緩慢加入5%的固體氯化鈉,在約5℃的溫度下靜置48h,離心,沉淀用0℃丙酮洗滌,干燥,即得溶菌酶。
溶菌酶優點
1.溶菌酶是很穩定的蛋白質,有較強的抗熱性。蛋清溶菌酶是C型,是已知的zui耐熱的酶;
2.溶菌酶不會因為有機溶劑的處理而失活,當轉移到水溶液中時,溶菌酶的活力可全部恢復;
3.溶菌酶可被冷凍或干燥處理,且活力穩定;
4.溶菌酶適宜pH5.3~6.4,可用于低酸性食品防腐;
5.溶菌酶生物試劑成本較低;
6.溶菌酶的抗菌譜較廣,不僅局限于G- 菌,對部分G+菌也有抑制效果;
7.溶菌酶作為防腐劑安全性高。溶菌酶是一種天然蛋白質,1992年FAO/WTO 的食品添加劑協會已經認定溶菌酶在食品中應用是安全的。
溶菌酶應用
它對革蘭陽性菌、好氧性孢子形成菌、枯草桿菌、地衣型芽孢桿菌等都有抗菌作用,而對沒有細胞壁的人體細胞不會產生不利影響。因此,適合于各種食品的防腐。另外,該酶還能殺死腸道球菌,增加腸道抗感染力,同時還能促進嬰兒腸道雙歧乳酸桿菌增殖,促進乳酪蛋白凝乳利于消化,所以又是嬰兒食品、飲料的良好添加劑。溶菌酶對人體*無毒、*,具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤的功效,是一種安全的天然防腐劑。在干酪的生物試劑中,添加一定量的溶菌酶,可防止微生物污染而引起的酪酸發酵,以保證干酪的質量。新鮮的牛乳中含有少量的溶菌酶,每100mL約含13mg,而人乳中含有40mg/mL溶菌酶。若在鮮乳或奶粉中加入一定量的溶菌酶,不但有防腐保鮮劑的作用,而且可達到強化嬰兒乳品的目的,有利于嬰兒的健康。
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