產品更新-小鼠成纖維細胞
培養基 EMEM完-全培養基:90%EMEM+10%FBS
傳代方法 復蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內全部溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完-全培養基的離心管內,1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL完-全培養基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL完-全培養基的T25瓶中,放入培養箱培養。
細胞傳代:①將舊培養液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,即消化完成,否則繼續消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL完-全培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當的完-全培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。;④注意培養基pH值變化和細胞密度,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%-90%時,重復傳代操作或者凍存。
生長條件 37℃;5%CO2+95%空氣;
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
安全等級 1
形態 成纖維細胞樣,多角形,圓形,邊緣不規則,單層貼壁生長,背景干凈,不產色素,無空泡
應用領域 1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠結締組織),細胞系L的克隆。細胞系L是最早建立的連續培養細胞系之一,而clone 929是最早的克隆株。 從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松結締組織入脂肪組織中建立了親本細胞系L。 第95代的細胞系L使用毛細管法分離單細胞建立了clone929。 檢測發現鼠痘病毒陰性。