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PGE2前列腺素E2產(chǎn)品用途

發(fā)布時(shí)間: 2021-04-13  點(diǎn)擊次數(shù): 757次

PGE2前列腺素e產(chǎn)品用途

 

前列腺素是二十碳不飽和脂肪酸花生四烯酸經(jīng)酶促代謝產(chǎn)生的一類脂質(zhì)介質(zhì)。花生四烯酸在各種生理和病理刺激下經(jīng)磷脂酶A2(phopholipaseA2,PLA2)催化經(jīng)細(xì)胞膜膜磷脂釋放,在前列腺素H合成酶(prostaglandin Hsynthase,PGHS),又稱環(huán)氧化酶(cyclooxygenase,COX)的環(huán)氧化活性和過(guò)氧化活性的作用下,依次轉(zhuǎn)變?yōu)榍傲邢偎刂虚g代謝產(chǎn)物PGG2和PGH2,然后經(jīng)過(guò)下游不同的前列腺素合成酶的作用代謝生成各種有生物活性的前列腺素,包括PGI2、PGE2、PGF2α、PGD2、血栓素A2(ThromboxaneA2,TxA2)。

外觀與性狀:白色晶體
密度:1.148 g/cm3
沸點(diǎn):530.071ºC at 760 mmHg
熔點(diǎn):66-68 °C
閃點(diǎn):288.452ºC
水溶解性:insoluble
穩(wěn)定性:Stable under normal temperatures and pressures. Light sensitive.
儲(chǔ)存條件:-20ºC
蒸汽壓:0mmHg at 25°C

 

生物試劑方法
以羊精囊為原料 反應(yīng)液的制備 取-30℃冷藏的羊精囊,除去結(jié)締組織及脂肪,每1kg加1L 0.154mol/L氯化JIA溶液,在4000r/min下離心25min,取上清液,過(guò)濾,得清液。殘?jiān)?span id="njdxhrjbzpfj" class="bjFfcClass" style="color: red">氯化jia再提取一次,離心過(guò)濾后,合并二次上清液。加2mol/L枸櫞酸調(diào)pH5,在4000r/min下離心25min,棄上清液,加100 ml 0.2mol/L磷酸鹽緩沖液洗下沉淀,再加100ml 6.2.5×10-5 mol/L EDTA溶液攪勻,加2mol/L氫氧化鉀調(diào)pH8,得酶混懸液。取酶的混懸液,每升加氫醌40mg、加GSH 500mg,先用少量水溶解后,加入酶的混懸液中,再將1kg羊精囊加1g AA,攪拌通氧,升溫至37-38℃,孵育1h,得反應(yīng)液。 綿羊精囊[pH8]→[KCl, EDTA Na2]酶混懸液[氫醌,谷胱甘肽]→[花生四烯酸,O2]反應(yīng)液 PGE粗品的制備 將反應(yīng)液加丙酮(次3倍量,第二次2倍量)提取兩次,每次0.5-1h,過(guò)濾,合并兩次濾液,45℃減壓濃縮或薄膜濃縮,得濃縮液。加4mol/L鹽酸調(diào)pH 3,加乙mi、0.2mol/L磷酸鹽緩沖液、石油醚分別萃取3次,取水層,加4mol/L鹽酸調(diào)pH 3,加二氯甲烷萃取3次,二氯甲烷層經(jīng)水洗、無(wú)水硫酸鈉脫水后,密塞置冰箱中過(guò)夜,過(guò)濾,40℃以下減壓濃縮得黃色油狀物,即PGS粗品。每1g PGS粗品用15g 100-160目活化硅膠,濕法裝柱。將PGS粗品溶解于少量,過(guò)柱層析分離,:V石油醚:V水1和PGE2部分。將PGE2部分于35℃以下充氮濃縮至無(wú)醋酸味,加乙酸乙酯溶解,加水洗酸,pH4-5,加生理鹽水除銀。乙酸乙酯溶液加無(wú)水硫酸鈉干燥,充氮,密塞,置冰箱過(guò)夜,過(guò)濾,濾液于35℃以下充氮濃縮,得PGE2精晶,經(jīng)乙酸乙酯-己烷重結(jié)晶2次,得PGE2成品。 PGE粗品[硝酸銀硅膠柱]→PGE2(油)[乙酸乙酯-己烷]→PGE2。

 

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