信帆生物提供促黃體生成激素放免代測服務一步到位
促黃體生成激素(LH)放免藥盒 [使用目的]
用于定量測定人血清(或血漿)中促黃體生成激素(LH)的濃度。
[用途]
促黃體生成激素(LH)是垂體前葉分泌,有兩條多肽鏈通過共價鍵結合的糖蛋白激素,分子量為 30000,參與性腺內分泌功能調控。對女性,在月經中期 LH 達到高峰時促成排卵,促進卵泡變為黃體,促進間質生長和孕酮合成;對男性,促進睪丸 Leydig 間質細胞分泌睪丸酮,協同 FSH 促進精子形成。促黃體生成激素(LH)的測定是判斷下丘腦-垂體-性腺軸功能的常規檢查方法,在預測排卵時間、絕經期和不孕癥的診斷和內分泌治療方面,具有重要意義。
本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理:含促黃體生成激素(LH)的樣品和 125I 標記的促黃體生成激素(LH)與相應的抗體反應形成抗原抗體復合物。反應后加入二抗及 PEG,使免疫復合物沉淀,離心,測沉淀放射性計數。通過標準曲線得到樣本中促黃體生成激素(LH)的濃度。
[試劑主要組成成分]
1、 LH 標準品:一套共 7 瓶,以不含 LH 的人血清為基質,用時輕輕搖勻,需冷存。LH 標準品濃度
A B C D E F G (單位) 0 5 10 25 50 100 200 mIU/mL
本 藥 盒 標 準 品 濃 度 采 用 WHO 2ndIRPHMG, 與 WHO 68/40 的 換 算 關 系 為 :
mIU/ml[2ndIRPHMG]×0.65=mIU/ml[68/40]
2、 質控血清:兩瓶,1.0ml/瓶
濃度為:L:11.05±2.79 mIU/ml H:22.53±7.31 mIU/ml
3、抗 LH 抗體: 一瓶,綠色溶液,2~8℃冷存。
4、 125I-LH: 一瓶,< 88.23 kBq/瓶,紅色溶液,2~8℃冷存。
5、 分離劑: 兩瓶,藍色溶液,充分搖勻后使用,2~8℃冷存。
樣本收集和保存:
220 微升人血清樣本。采靜脈血 5ml 于塑料試管中,靜置使其凝固后,1500 轉/分離心,取其上清液,放置玻
璃瓶中。如果樣本不立即使用,可在-18℃~-25℃儲存 6 個月。
重溶血、高濃度的脂類、膽紅素對測定結果有影響。
[使用前準備]
試驗前,恢復樣本至室溫,小心搖勻血清樣本。
[實驗方法]
操作方法 I 1、 將實驗所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進行操作;
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進行編號,所有實驗均做雙管重復;
3、 取每個濃度的標準品、質控血清和樣本 200µl 加入相應編號的試管中;
4、 每管均各加入 200µl 抗體工作液;
5、 37℃溫育 0.5 小時;
6、 每管均各加入 200µl 標記工作液,充分混勻;
7、 37℃溫育 1.5 小時;
8、 每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻;
9、 室溫放置 5~10 分鐘后,離心 3500 轉/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液; 9、用 γ-計數器測定各管計數CPM. 檢測時間: 1 分鐘
10、 從標準曲線上讀取樣本及質控血清的濃度。
[質量控制]
每次實驗操作應至少采用兩個濃度的質控血清進行質量控制,以確保每次實驗測定結果的可靠性。
1、 質控血清的平均值應在允許范圍內;
2、 曲線方程應采用*擬合方式;
3、 重復樣本的測定結果相差在 15%以內。
如不能同時滿足以上條件,則此次試驗結果無效,全部試驗需重新進行。
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