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ACK紅細(xì)胞裂解液無(wú)菌溶液組織樣本的操作提醒
去除紅細(xì)胞的方法有多種,信帆生物生物試劑的ACK紅細(xì)胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也稱為ACK Lysis Buffer,是一種從人、鼠或其他哺乳動(dòng)物等體內(nèi)的組織樣品或血液中裂解并去除無(wú)核紅細(xì)胞的溶液,其主要有效成分為氯化銨,ACK Lysis Buffer經(jīng)過(guò)優(yōu)化配方,在裂解無(wú)核紅細(xì)胞的同時(shí)幾乎不損傷淋巴細(xì)胞(lymphocyte)或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞。
ACK Lysis Buffer對(duì)于裂解、去除有細(xì)胞核紅細(xì)胞,例如鳥或禽類的紅細(xì)胞,效果不佳,裂解類似細(xì)胞時(shí),不建議采用。本裂解液經(jīng)過(guò)濾除菌,經(jīng)過(guò)ACK Lysis Buffer處理過(guò)的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測(cè)。
規(guī)格:100ml
保存:4℃,
有效期:12個(gè)月
用途:去除細(xì)胞懸液中的紅細(xì)胞,屬于溶解紅細(xì)胞方法的一種
說(shuō)明:無(wú)菌溶液。注意無(wú)菌操作,經(jīng)過(guò)濾除菌處理。
ACK紅細(xì)胞裂解液無(wú)菌溶液組織樣本的操作提醒
組織細(xì)胞樣本的常規(guī)操作:
1、制備細(xì)胞懸液: 新鮮組織經(jīng)過(guò)胰蛋白酶或膠原酶等消化處理,通過(guò)適當(dāng)方法制備成細(xì)胞懸液,離心棄上清。
2、裂解: 加入3~5倍細(xì)胞沉淀體積的ACK Lysis Buffer,輕柔吹打混勻,裂解1~2min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳,亦可在室溫下操作。
3、離心: 4℃,400~500g離心5min,棄紅色上清。如無(wú)低溫離心機(jī)本步驟亦可在室溫下操作。
4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不*,可以重復(fù)上述步驟2和步驟3各一次。
5、洗滌:根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液,輕柔混勻重懸沉淀。4℃,400~500g離心2~3min,棄上清,離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS,HBSS,生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液的量一般應(yīng)大于細(xì)胞沉淀體積的5倍以上!
ACK紅細(xì)胞裂解液無(wú)菌溶液組織樣本的操作提醒