抗血清注射途徑可根據不同抗原及試驗要求,選用皮內、皮下、肌肉、靜脈或淋巴結內等不同途徑注入抗原進行免疫。一般常采用背部、足掌·耳后等處皮內或皮下多點注射。初次免疫與第二次免疫的間隔時間多為2~4周。常規免疫方案為抗原加CFA皮下多點注射進行基礎免疫;再以免疫原加IFA作2~5次加強免疫,每次間隔2~3周,皮下或腹腔注射加強免疫。
1)常規(皮內多點注射)免疫:
1一次免疫:劑量為每只兔子注射1.0 ml抗原乳劑(含抗原量1~2mg)。注射部位為兩只后腳掌的皮內各注射0.2 ml,其余0.6 ml分多點注入脊柱二側,頸部,腹股溝和腋窩等處淋巴結附近部位皮內,每點可注入0.05ml,分12點注入。
2第二次免疫:初次免疫后20天左右,劑量為1.0ml/只(1~2 mg/ml),加福氏不*佐劑。注射部位在腹部皮下多點注射,每點注入0.1 ml。
3第三次免疫:再次免疫后兩周內進行,注射劑量和部位同第二次免疫,免疫后7~14d抽取少許靜脈血,分離血清,試血測定效價。
2)淋巴結免疫:主要優點是可減少用量。過程如下:
1卡價苗致敏:免疫前足掌皮下每側各注入活卡價苗(75 mg/ml)0.3 ml。10天左右觀察兩側腘窩淋巴結,一般可腫脹如蠶豆大小,此時即可進行淋巴結內免疫注射。
2一次免疫:用手淋巴結后在兩側腘窩淋巴結內各注入抗原乳劑0.25ml,每只兔總量0.5 ml;為加強免疫,于初次免疫20天后,于腹部皮下多點注射不加佐劑抗原溶液1mg/1ml。
3二周后可如同一次免疫的劑量和途徑再注射一次,一般可在第三次免疫注射前試血滴定效價,效價如已達到要求可不必進行第三次免疫。
有條件的情況下,免疫后要加強動物飼料管理,如給熟黃豆飼養等。
3)腹腔免疫:一般不必加佐劑,適用于細胞性或顆粒性抗原,而且抗原性較強者,例如用綿羊紅細胞免疫家兔或小鼠即可用此法。