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小鼠白細胞介素 4(IL-4)ELISA檢測試劑盒檢測原理
檢測原理
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠白細胞介素 4(IL-4)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白細胞介素 4(IL-4)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑盒性能
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:檢測濃度小于 1.0 pg/mL。
3. 檢測范圍:5 pg/mL - 160 pg/mL 。
4. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
5. 重復性:板內變異系數小于10%、板間變異系數小于15%。
6. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
7. 有效期:6個月
小鼠白細胞介素 4(IL-4)ELISA檢測試劑盒檢測原理