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RNA Marker 1000使用妙招
產品簡介
本產品RNA Marker 1000由體外轉錄得到的7條高純度單鏈RNA組成,其長度分別為100、200、300、400、600、800、1000 Bases,每微升產品中RNA量約為700 ng,適用于RNA的常規凝膠電泳。
操作步驟
1. 取1-2 μL RNA Marker 1000與2×RNA Loading Buffer按等體積比例混合,置于70℃孵育10 min后,立即冰浴2 min,即可進行電泳檢測;
2. RNA電泳:
A. 普通瓊脂糖凝膠電泳(不推薦):2-5%瓊脂糖凝膠(加入核酸染料EB),用TAE Buffer進行電泳;
B. 甲醛瓊脂糖變性凝膠電泳(推薦):1-3%瓊脂糖凝膠,以1%瓊脂糖凝膠制備為例:稱取0.5 g瓊脂糖加入36 mL RNase-Free Water(推薦G4700或G3004)中,加熱溶化后,加入5 mL 10×MOPS Buffer,待溶液冷卻至不燙手時,加入9 mL 37%甲醛溶液,根據需要加入核酸染料EB,混勻后倒膠。用1×MOPS Buffer進行電泳,結束后即可經凝膠成像儀觀察。
注意事項
1. 實驗時請帶好實驗手套、口罩,實驗耗材需無菌無酶,防止RNase污染導致RNA降解。
2. RNA marker條帶為單鏈線性RNA,適用于單鏈線性RNA樣品的分子量參照,對于Total RNA,本產品只能作為定性參照。
3. 為了避免RNA Marker反復凍融降解,建議進行合理分裝使用