活化部分凝血活酶時間(APTT)試劑盒樣本的要求
預期用途:
用于科研實驗中血漿中活化部分凝血活酶時間測定。
檢測原理:
待測血漿加入部分凝血活酶溶液,在Ca參與下纖維蛋白原轉變為不溶性纖維蛋白,測定
凝固所需的時間,即為待測血漿活化部分凝血活酶時間
樣本要求:
靜脈釆血,置于含有1/10體積0.109mol/L枸櫞酸鈉抗凝液(1份抗凝液+9份全血)的塑料管或硅化玻璃管中,輕輕顛倒混勻,3000rpm(或2500g)離心15分鐘,收集上層液(血漿,黃色)。
2.采血必須使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器,貯血必須使用塑料試管或硅化玻璃管。不宜使用普通玻璃器,避免凝血因子活化。
3.采血時止血帶不可束縛過緊,而且不應超過5分鐘,否則導致凝血及纖溶因子活化。
4.不宜使用EDTA•Na2、肝素、草酸鹽作為抗凝劑。
5.紅細胞比容超過55%或小于20%時,應調整抗凝劑用量。抗凝劑體積(ml)=0.00185×血液體積(m1)×(100—比容)。
6.樣本采集避免溶血及組織液污染。
7.樣本在不同條件下可保存時間如下:+2~+8℃保存,不宜超過6小時;+22~+24℃保存,不宜超過2小時測定。
8.樣本暴露于空氣中可使pH值升高,因此若不能立即測定,應將樣本加塞保存。
檢驗方法: 1.試劑使用前請振搖均勻
2.半自動凝血儀、手工測定
(1)取待測血漿0.1m1,加入37℃預溫APTT試劑0.1ml,37℃孵育5min
(2)加入37℃預溫0.025 mol/L CaCl2溶液0.1ml,記錄凝固時間。
3.全自動凝血儀/全自動生化分析系統測定
請按儀器提供的參數操作。
參考區間: 人22~38秒(n=200,X±2SD作為參考區間的上、下限。)
各實驗室可建立自己的參考區間
檢驗結果的解釋: 1.樣本內若有殘留細胞,經凍融后細胞膜受破壞可影響結果
2.測定溫度36.5~38.5℃,過低或過高溫度均使APTT延長。
3.口服避孕藥、雌激素、妊娠類藥物、肝素、天冬酰胺酶、納絡酮可影響APTT。
4.當測定結果出現異常時,應檢查檢測系統的每個組成,如試劑、樣本、質控、儀器等,必要時重新測定。