發(fā)布時(shí)間: 2023-02-22 點(diǎn)擊次數(shù): 506次
糖原PAS染色試劑盒適用范圍
描述:
多糖類物質(zhì)主要有糖原、粘多糖、黏蛋白、糖蛋白和糖脂類。機(jī)體組織中的多糖物質(zhì)分布廣泛,肝臟、消化呼吸道上皮表面和腺體的粘液、軟骨基質(zhì)等。過碘酸-雪夫試劑染色方法是顯示組織中糖類含量多少的有效、經(jīng)典的方法。過碘酸是一種強(qiáng)氧化劑,能將糖原分子中的乙二醇氧化成為二醛基(CHO--CHO),后者可與Schiff液(雪夫氏液)反應(yīng),形成紫紅色反應(yīng)產(chǎn)物,其顏色深淺取決于樣本內(nèi)能參與反應(yīng)的乙二醇的多少,從而間接顯示糖原的多少。過碘酸-Schiff試劑廣泛用于顯示組織中糖類存在和含量變化的研究中。
適用:
鑒定組織中糖類存在和顯示多糖類物質(zhì)含量變化。
儲(chǔ)存:
避光4℃ 6個(gè)月。
樣本處理:
1. 石蠟切片:需脫蠟至水。
(1) 脫蠟:二甲苯I、II分別脫蠟5~10min。
(2) 脫水:無水乙醇、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇脫水3-5min。
(3) 蒸餾水洗3次,每次3min。
2. 冷凍切片:
(1) 甲醛或乙醇固定5min。
(2) 蒸餾水洗3次,每次3min。
3. 細(xì)胞涂片或爬片:
(1) 甲醛固定10min。
(2) 蒸餾水洗3次,每次3min。
染色步驟:
1. 切片至水。
2. 入R1氧化液中氧化 2-5分鐘。蒸餾水洗。
3. 入R2 Schiff 試劑染色 15分鐘。
4. 入R3溶液,洗3遍,共6分鐘。
5. 流水洗5分鐘,蒸餾水洗1分鐘。
6. 入胞核染色液內(nèi)染色2-5分鐘(可省略)。蒸餾水洗后,吸干。
7. 95%乙醇、無水乙醇脫水、二甲苯透明、中性樹膠封片。
染色結(jié)果:
陽性反應(yīng)呈不同程度的紫紅色,糖原多著色深可呈顆?;驂K狀。胞核呈藍(lán)色。
說明:
1. 嚴(yán)格控制R1氧化液中的時(shí)間,避免過度氧化。
2. 理想的Schiff 試劑應(yīng)為淡黃或無色;如果Schiff 試劑變紅應(yīng)棄用。
3. 第一次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
4. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。