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天狼星紅染色液需要準(zhǔn)備哪些材料。
天狼星紅染色液主要由 Weigert 鐵蘇木素染色液、天狼星紅染色液組成,主要用于 各種組織病變時(shí)對(duì)膠原纖維異常或纖維增生的研究中。天狼星紅與其襯染液都是是強(qiáng)酸性染料,易與膠原分子中的堿性基團(tuán)結(jié)合,吸附牢固。在普通光學(xué)顯微鏡下心臟血管等組織的 膠原纖維被染成紅色,肌纖維被染成黃色,在偏振光鏡下對(duì)各種纖維化病變的分型和分級(jí)研究 有一定的幫助作用。采用免疫組化技術(shù)也可顯示Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維,但所用抗體昂貴,操作費(fèi)時(shí),而采用天狼星紅染色試劑便宜,操作簡(jiǎn)單。
自備材料:
1. 10%的福爾馬林固定液
2. 普通光學(xué)顯微鏡或偏振光顯微鏡
操作步驟(僅供參考):
1. 組織固定于 10%福爾馬林固定液,常規(guī)脫水包埋。
2. 切片厚度 6µm,常規(guī)脫蠟至水。
3. weigert 鐵蘇木素染色液染色 10-20min。
4. 酸性分化液分化數(shù)秒(可省略)。
5. 自來(lái)水洗 5-10min,蒸餾水洗一次。
6. 天狼星紅染色液滴染 1h。
7. 流水稍微的沖洗,去除切片表面染液。8. 常規(guī)脫水透明,中性樹(shù)膠封固。
染色結(jié)果:
普通光學(xué)顯微鏡:
膠原纖維 紅色
細(xì)胞核 藍(lán)色
肌纖維 黃色
偏振光顯微鏡:
Ⅰ型膠原纖維 強(qiáng)橙黃色或亮紅色
Ⅲ型膠原纖維 綠色