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凍干粉標準菌株傳代和復壯
【冷凍管開封】 用浸過 75%酒精的脫脂棉嚴格消毒冷凍管蓋。
【菌株復溶】無菌環境中旋開裝有復溶液的滴瓶蓋,吸取 1ml 左右復溶液,加入到冷凍管中。輕輕振蕩,使凍干菌 株溶解呈懸浮狀。
【菌株復壯】用無菌吸管吸取菌懸液,轉移到復溶液滴瓶中。做好標識,在適宜溫度下培養。細菌在 30-35℃培養 箱中培養 24-48h,真菌在 20-25℃培養箱中培養 24-72h(必要時,可適當延長培養時間)。
【菌株傳代】將得到的菌株的新鮮培養物轉接到適宜的固體培養基及液體培養基中(盡量增大接種量:如用無菌吸 管吸取≥50μl 新鮮培養物至固體培養基,邊移動邊緩慢釋放),適宜溫度下培養,用以菌株的保藏、傳 代及制備工作菌株。
【注意事項】
1、 菌種活化前,將冷凍管保存在低溫、清潔、干燥的環境中,長時間室溫下放置會導致菌種衰退;
2、 冷凍管開封、凍干粉復溶、菌株恢復培養等操作應在無菌條件下進行;
3、 一些菌種經過冷凍干燥保存后,延遲期較長,部分需連續兩次繼代培養才能正常生長;
4、 苛養菌的培養需采用含特定營養成分的培養基,敬請正確選擇,不清楚時來電詢問;
5、 某些厭氧菌的培養,自開封到接種完成,均需以無氧氣體充填,以保持厭氧狀態;培養過程中亦要保 持厭氧狀態;
6、 某些菌種,如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需要 5-10%CO2促進生長;
7、 如發現冷凍管蓋松動、復溶液渾濁等異常情況,應停止使用對應產品。
8、 部分菌種有致病性、擴散性,請專業人員在專業環境下有保護性操作。