ATP含量檢測試劑盒產品詳情
產品說明:
ATP 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細胞能量
代謝狀態的主要參數。測定 ATP 含量并且計算能荷,能夠反映能量代謝狀態。
HK 催化葡萄糖和 ATP 合成 6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步催化 6-磷酸葡萄糖脫氫
生成 NADPH ,NADPH 在 340nm 有特征吸收峰,NADPH 和 ATP 含量成正比,以此反應 ATP 含
量。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計、水浴鍋、可調式移液槍、1mL 石英比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水和lv仿。
操作步驟:
一、ATP 的提取:
1、血清(漿)中 ATP 的提取:按照血清(漿)體積(mL):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL 血清(漿),加入 1mL 提取液),充分震蕩,10000g,4℃離心 10min;取上清液至另一 EP 管中,加入 500μL 的lv仿充分震蕩混勻,10000g 4℃離心 3min,取上清,置
冰上待測(不可用于蛋白質含量測定)。
2、組織中 ATP 的提取:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿,8000g 4℃離心 10min,取上清至另一 EP 管中,加入500μL 的lv仿充分震蕩混勻,10000g 4℃離心 3min,取上清,置冰上待測(不可用于蛋白質含量測定)。
3、細胞或細菌中 ATP 的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎 1min(冰浴,強度 20%或 200W,超聲 2s,停 1s),10000g 4 ℃離心 10min;取上清液至另一 EP 管中,加入 500μL 的lv仿充分震蕩混勻,10000g 4℃離心 3min,取上清,置冰上待測(不可用于蛋白質含量測定)。
二、測定步驟:
1、紫外分光光度計預熱 30 min 以上,調節波長到 340nm,蒸餾水調零。
2、將 10μmol/mL 的 ATP 標準溶液用蒸餾水稀釋 16 倍即 0.625 μmol/mL 標準溶液備用。
3、工作液的配制:臨用前請按試劑二(mL):試劑三(mL):試劑四(mL):試劑五(mL):試劑六(mL)=1:1:0.1:0.4:0.1 的比例配制,現配現用。
信帆生物公司主要代理產品:
ELISA試劑盒:進口ELISA試劑盒,國產ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。
培養基:微生物培養基,顯色培養基,BD培養基,gibco培養基等。
血清:胎牛血清,人血清,動物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進口試劑。
標準品對照品:進口對照品,進口對照藥材,進口標準品.
抗體:一抗,二抗,流式抗體等。
放免試劑盒:進口放免試劑盒,國產放免試劑盒,進口美國鳳凰等放免試劑盒。
實驗室代測服務:放免代測,WB實驗,免疫組化代測,熒光定量PCR代測,病理細胞染色代測,生化實驗代測等。
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