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下面我們來看看細(xì)胞粘附劑的使用方法:
1. 使用時,將此濃縮溶液以1:200-1:500比例稀釋于滅菌純水或生理鹽水(0.9% NaCl)或PBS緩沖液中,制備成工作溶液。注意:不同細(xì)胞對粘附劑的敏感度不同,通常粘附劑處理后的器皿培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)及生長狀態(tài)均應(yīng)正常,如果細(xì)胞比較敏感,選用高濃度的細(xì)胞貼壁粘附劑會使細(xì)胞過度粘著,有可能出現(xiàn)細(xì)胞褶皺、偽足伸出不暢或細(xì)胞移動分散不佳等現(xiàn)象,此時應(yīng)將其進(jìn)行高比例稀釋,避免出現(xiàn)以上情況。
2. 加入新鮮工作液使其*覆蓋培養(yǎng)瓶皿表面。室溫或37 ºC孵育30 min,偶爾搖動。
3. *棄去瓶皿中的液體。可用滅菌蒸餾水或滅菌生理鹽水或PBS緩沖液等洗滌瓶皿一次,但也可不洗滌而盡量甩干后直接鋪種細(xì)胞。經(jīng)過處理的瓶皿可存放數(shù)天后使用。
4. 甩干瓶皿即可用于鋪種細(xì)胞,增加多種原代培養(yǎng)細(xì)胞如神經(jīng)元細(xì)胞的貼壁能力。