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溴化乙錠清除劑又稱溴化乙錠清除劑,專門用于溴化乙錠/EB污染。它能有效破壞溴化乙錠的分子結(jié)構(gòu),不但能消除EB的熒光,減少對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的影響,更重要的是它能使EB的致突變性降低99%以上,從而實(shí)現(xiàn)EB的去毒,保障研究人員和環(huán)境的安全主要由A液 50ml和B液100ml組成,常采用A:B:水=1:2:100使用。
溴化乙錠清除劑具有下列特點(diǎn):
1. 能快速滲透到新鮮血液細(xì)胞內(nèi),抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常溫可放置3天,4℃可放置5天,-20℃可放置3個(gè)月。
2. 操作簡(jiǎn)單,直接將本產(chǎn)品和新鮮血液細(xì)胞沉淀按比例混合即可。
3. 適用于人新鮮血和哺乳動(dòng)物新鮮血液,不適用于陳舊血液和凍凝血液,也不適用于禽類血液和其他動(dòng)物血液。
4. 重復(fù)性好,效果跟進(jìn)口同類產(chǎn)品相當(dāng)。
5. 保存的樣品可直接用本公司血液RNAout提取RNA。
溴化乙錠清除劑使用及效果
將本產(chǎn)品與新鮮血液樣品按4:1的比例(4份本產(chǎn)品加1份新鮮血液)混合后即可放置。放置結(jié)束后將樣品轉(zhuǎn)移到離心管中,5000 g室溫離心1分鐘,小心吸出淺粉紅色的上清液,棕紅色沉淀(血細(xì)胞和蛋白沉淀)直接用于后續(xù)的總RNA提取。
1. 新鮮細(xì)胞:如果試劑沒有問題,且外源性污染也可以排除,那么降解幾乎都來自裂解液的用量不足。如果將裂解液直接加入培養(yǎng)皿中裂解細(xì)胞,一定要使裂解液能覆蓋住細(xì)胞。
2. 新鮮組織:某些富含內(nèi)源核酸酶的樣品(如肝臟,胸腺等),即使使用電動(dòng)勻漿器勻漿也不能避免RNA的降解。溴化乙錠清除劑更可靠的方法是:在液氮條件下將組織研碎,并且勻漿時(shí)使用更多裂解液。
3. 冷凍樣品:樣品取材后應(yīng)立即置于液氮中速凍,然后移至-70℃冰箱保存。樣品決不能未經(jīng)液氮速凍而直接保存于-70℃冰箱中。冷凍樣品,即使是冷凍細(xì)胞,如果不在液氮條件下研磨碎,而直接加入裂解液中勻漿,RNA也比新鮮樣品更容易降解。樣品在與裂解液充分接觸前決不能出現(xiàn)融化,所以研磨用具必須預(yù)冷,在碾磨過程中要及時(shí)補(bǔ)充液氮。樣品研碎后,在液氮?jiǎng)倓倱]發(fā)完時(shí),將樣品迅速轉(zhuǎn)移到含裂解液的容器中,立即混勻勻漿。
4. 外源RNA酶的污染:試劑,器械及實(shí)驗(yàn)環(huán)境中的RNA酶進(jìn)入實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),可考慮華越洋產(chǎn)品:外源RNA酶清除劑(RNase remover)解決。
5. 內(nèi)源RNA酶的污染:抑制劑失效或者用量不夠,實(shí)驗(yàn)樣品過多;勻漿時(shí)溫度過高。
溴化乙錠清除劑RNA提取得率低
1. 該組織或者細(xì)胞中RNA含量偏低:不同細(xì)胞和組織中RNA的豐度不同,如肝臟,胰腺,心臟等是高豐度組織(總RNA含量2-4μg/mg),腦,胚胎,腎臟,肺,胸腺,卵巢等是中豐度組織(總RNA含量0.05-2μg/mg),膀胱,骨,脂肪等是低豐度組織(總RNA含量<0.05μg/mg)。
2. 組織起始量太少或者太多:樣品量過少,則細(xì)胞組織中RNA含量較低;樣品量過多則可能超過裂解液的裂解能力,裂解將不*,從而導(dǎo)致RNA得率低。
信帆生物公司主要代理產(chǎn)品:
ELISA試劑盒:進(jìn)口ELISA試劑盒,國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清:胎牛血清,人血清,動(dòng)物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。
標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品:進(jìn)口對(duì)照品,進(jìn)口對(duì)照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.
抗體:一抗,二抗,流式抗體等。
放免試劑盒:進(jìn)口放免試劑盒,國(guó)產(chǎn)放免試劑盒,進(jìn)口美國(guó)鳳凰等放免試劑盒。
實(shí)驗(yàn)室代測(cè)服務(wù):放免代測(cè),WB實(shí)驗(yàn),免疫組化代測(cè),熒光定量PCR代測(cè),病理細(xì)胞染色代測(cè),生化實(shí)驗(yàn)代測(cè)等