單寧含量檢測試劑盒操作原理是什么!
簡介:
單寧是葡萄酒中所含有的兩種酚類化合物其中的一種物質,尤其在紅葡萄酒中含量較多,有益于心臟血管疾病的預防。葡萄酒中的單寧一般是由葡萄籽、皮及梗浸泡發酵而來,或者是因為存于橡木桶內而萃取橡木內的單寧而來。單寧的多少可以決定酒的風味、結構與質地。缺乏單寧的紅酒質地輕薄,沒有厚實的感覺,薄若萊紅酒就是典型代表。單寧豐富的紅酒可以存放經年,并且逐漸醞釀出香醇細致的陳年風味。當葡萄酒入口后口腔感覺干澀,口腔黏膜會有褶皺感,那便是單寧在起作用。
產品說明:
單寧是一類廣泛存在于植物體內的多元酚化合物,又稱植物多酚。具有*的化學性質和多種生理活性,如能與蛋白質、生物堿、多糖結合;能與多種金屬離子發生絡合或靜電作用;具有止血、抑制微生物、抗過敏、抗突變、抗腫瘤、抗衰老等生理活性。單寧在堿性環境下與磷鉬酸反應,生成藍色化合物,在760nm 處有大吸收峰。
檢測原理:
測定原理:單寧在堿性環境下與磷鉬酸反應,生成藍色化合物,在760nm 處有大吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。
操作步驟:
一、 單寧的提取:
按照組織質量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10 的比例(建議稱取約0.1g 組織,加入1mL蒸
餾水),充分勻漿后轉移到EP 管中,80℃水浴提取30min,8000 g,25℃離心10 min,取上清液待
測。
二、 測定步驟:
1、 分光光度計預熱30min以上,調節波長至760nm,蒸餾水調零;試劑一和試劑二37℃預熱10min
以上。
混勻,室溫靜置30min,760nm 處讀取吸光值A,ΔA=A 測定-A 對照,對照管只要做一管。
三、 單寧含量計算:
1、 標準條件下測定的回歸方程為y = 0.008x - 0.0021;x 為標準品濃度(μg/mL),y 為吸光值。
2、 按樣本鮮重計算:
單寧含量(μg /g 鮮重)= [(ΔA+0.0021) ÷0.008×V1]÷(W×V1÷V2)=125×(ΔA+0.0021) ÷W。
3、 按樣本蛋白濃度計算:
單寧含量(μg /mg prot)= [(ΔA+0.0021) ÷0.008×V1]÷(V1×Cpr)=125×(ΔA+0.0021) ÷Cpr。
V1:加入樣本體積,0.015mL;V2:加入提取液體積,1mL; Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;
W:樣本鮮重,g。
單寧含量檢測試劑盒操作原理是什么!