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大鼠芳香酶(ARO)ELISA試劑盒大促!

發布時間: 2018-04-25  點擊次數: 1987次

大鼠芳香酶(ARO)ELISA試劑盒大促!

產品簡介:

芳香化酶(aromatase, CYP19)是細胞色素P450酶系中的一種, 可以催化雄烯二酮、睪酮脫去19位碳并使A環芳構化, 分別形成雌二醇和雌酮, 它是雌激素生物合成的限速酶。芳香化酶是屬于細胞色素P450的一種復合酶,可氧化脫去C19類固醇(雄烯二酮和睪酮)的19-甲基,使A環芳構化,從而轉變成C18雌激素(雌酮和雌二醇)。因此,芳香化酶是體內合成雌激素的重要酶。

實驗原理:

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠芳香酶(ARO)水平。用純化的大鼠芳香酶(ARO)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入大鼠芳香酶(ARO),再與HRP標記的檢測抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠芳香酶(ARO)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠芳香酶(ARO)含量。

我司銷售的ELISA試劑盒,質量穩定,靈敏度高,是多家單位的供貨商,歡迎大家!

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操作步驟:

1. 標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 加酶:每孔加入酶標試劑100μl,空白孔除外。
4. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
7. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
9. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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