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MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒現貨供應

發布時間: 2018-01-30  點擊次數: 1126次

MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒現貨供應,南京信帆生物科技有限公司!

MTT 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒


產品簡介:
MTT 比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT 細胞增殖及細胞毒性檢
測試劑 盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity AssayKit)被廣泛應用于細胞增
殖和細胞毒性 的檢測。MTT 檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性
MTT 還原為水丌溶性的藍紫色 Formazan 并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。在
特定溶劑存在的情況下,可
以被*溶解。然后通過酶標儀可以測定 570nm 波長附近的吸光度。細胞增殖越多
越快, 則吸光度越高;細胞毒性越大,則吸光度越低。
eMTT 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒采用了自主研發 Formazan solvent,使檢
測本底低,靈敏度高,線性范圍寬。 產品組成:
500T
試劑(A): MTT solution(5mg/ml) 5ml -20℃ 避光
試劑(B): Formazan solvent 60ml RT
使用說明書 1 份
自備材料:
1、 細胞培養液
2、 胰蛋白酶消化液
3、 低速離心機
4、 96 孔培養板
5、 細胞計數板或計數器
6、 細胞培養箱
7、 搖床
8、 顯微鏡
9、 酶聯免疫檢測儀
操作步驟(僅供參考):
1、細胞用含血清的培養液培養至對數生,常規胰蛋白酶消化液消化細胞(懸浮細胞無
需消化)。
上海信帆生物科技有限公司
2
2、低速離心,收集細胞沉淀。
3、用培養液重懸細胞沉淀,制備成單細胞懸液,并計數。
4、 細胞接種于 96 孔培養板,一般接種密度為 3000~10000 個細胞/孔。通常細胞增殖實
驗每孔加 3000 個細胞,細胞毒性實驗每孔加入 6000 個細胞。具體每孔所用的細胞的 數
目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定。
5、 37℃ 5%CO2 繼續培養或按照實驗具體需要進行培養,一般培養 6~24h。
6、 按照實驗具體要求,給予 0~20μl 干預藥物處理,37℃ 5%CO2繼續培養至合適時間。
7、 棄培養液,每孔加入 10μl MTT solution 和 100μl 新鮮培養液,在細胞培養箱內繼續 孵育 4h。
8、棄培養液,每孔加入 110μl Formazan solvent,置搖床上低速振蕩 10 min,使結晶物 充分
溶解。如果紫色結晶較小或較少,溶解的時間會短一些。如果紫色結晶較大或較多, 溶解的時間會
長一些。
9、在酶聯免疫檢測儀 570nm 測定各孔吸光度。 注意事項:
1、 MTT solution 盡量減少反復凍融的次數,當顏色變為灰綠色時,請勿使用。
2、 由于使用 96 孔板進行檢測,如果細胞培養時間較長,應注意蒸發問題。
3、 MTT solution 在低溫情況下會凝固,置于室溫或 20~25℃水浴至全部融解后使用。
4、 Formazan solvent 可以-20℃儲存,當產生沉淀或凝固時可以37℃水浴孵育以促進溶 解,并且必
須在全部溶解并混勻后使用。
5、 觀察 formazan 是否*溶解,亦可以借助光學顯微鏡觀察。
6、 培養細胞時盡量細菌避免污染。
7、 應注意設立 OD 調零孔和對照。
8、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 有效期: 12 個月有效。

MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒現貨供應

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