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游離脂肪酸測試盒說明書
[注]:此實驗必須用玻璃試管,不能用半自動及全自動分光光度計比色)
一、實驗儀器:
玻璃試管、微量移液器、旋渦混勻器、玻璃注射器、硬膜外麻醉針套、玻璃移液管、洗 耳球、低速離心機、37℃水浴箱(氣浴箱)、可見分光光度計(440nm)
二、適用范圍:本試劑盒可測各種動物血清、血漿、組織等樣本中 NEFA 的含量。
三、測定意義:
游離脂肪酸,別名非酯化脂肪酸,是脂肪水解產(chǎn)物,測定血清脂肪酸可以了解脂肪代謝的 情況,升高代表脂肪分解增加。
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四、操作步驟:
| 空白管 | 標準管 | 測定管 |
雙蒸水(ml) | 0.2 | 0.2 |
|
1000µmol/L 棕櫚酸(ml) |
| 0.2 |
|
待測樣本(ml) |
|
| 0.2 |
試劑二緩沖液(ml) | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
試劑三銅試劑(ml) | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
試劑一(ml) | 4.0 | 3.8 | 4.0 |
充分混勻抽提 2 分鐘,3500 轉(zhuǎn)/分離心 10 分鐘,仔細吸去上層藍色液體及蛋白凝
塊棄之,吸取下層抽提液 2ml 進行顯色。詳.細.操.作.見.注.。
下層抽提液(ml) | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
顯色劑(ml) | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
混勻,室溫放置 2 分鐘,在 440nm,1cm 光徑,試劑一調(diào)零比色。
五、計算
略
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